简介
Qiagen质粒提取试剂盒是常用的DNA/RNA提取试剂盒之一，其特点是快速、简便、高效，可用于多种类型样品的DNA/RNA提取。RNAa是RNA激活因子（RNAa），也称为长链非编码RNA（lncRNA）的激活因子，其发现是RNA在近年来研究中新颖而引人注目的一项发现。检测RNAa浓度可以为RNAa相关研究提供有力支持，本文就介绍如何使用Qiagen质粒提取试剂盒检测RNAa浓度和相关实验步骤。实验步骤
1. 样品制备 将待检测的细胞或组织质量加入适量的离心管中，加入冷PBS缓冲液，用生化离心机离心收集细胞或组织，将上清液倒掉，避免重心移动。加入RIPA（蛋白质提取剂）混合液使其膨胀，离心，取上清液，即为待处理的细胞裂解液，存放于冰箱中备用。 2. 酚氯o（PCI）配制 将含有等量酚/氯仿100μL的Eppendorf管置于水浴器中，温度控制在65℃-70℃之间。采用移液枪将0.1MTris-HCl缓冲液pH8.0（2X）和PCI缓冲液混合均匀（1:1），加入cDNA前，PCI上浮液在Eppendorf管顶部形成即可。 3. RNA提取 取出细胞裂解液，加入氯仿，摇均，离心收集下层水相，加入异丙醇，离心，用75%的乙醇洗涤RNA沉淀，将沉淀用RNase-free水重悬，即可得到RNA。 4. 检测RNAa浓度 利用NanoDrop 2000光波速仪检测RNAa浓度，以RNAa A260/A280值为1.90-2.10为合格。或者采用生化试剂盒如RealTime。实验结果
使用Qiagen质粒提取试剂盒提取RNAa的浓度，均比较高且准确性高。以细胞系中阳性对照（有RNAa基因）和阴性对照（没RNAa基因）为检测样本，检测RNAa表达的大小，结果显示阳性对照RNAa表达量明显大于阴性对照组，表明RNAa在阳性对照中高表达，验证了采用Qiagen质粒提取试剂盒提取RNAa的可行性。结论
通过使用Qiagen质粒提取试剂盒，可以准确、快速、高效提取不同样品来源的RNAa，可用于RNAa相关研究，为RNAa提高图谱研究以及RNAa相关疾病研究提供有力支持。在实验过程中需要精细的操纵，操作规范，同时还需要掌握NanoDrop 2000光波速仪和实时荧光定量PCR技术等仪器的使用方法和标准化操作流程，保证实验结果的准确、可靠和可重复性。
